1. 體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5% 異氟醚深度麻醉小鼠，然后2.5% 異氟醚維持麻醉。在頸部中線切開一個切口。

2. 分離右側(cè)的頸總動脈和迷走神經(jīng)。右側(cè)的頸總動脈暫時結(jié)扎。

3. 分離右側(cè)的頸外動脈和頸內(nèi)動脈，右側(cè)的頸內(nèi)動脈暫時結(jié)扎；右側(cè)的頸外動脈頭端結(jié)扎，近心端掛線備用。

4. 隨后，用無菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動脈上做一個小洞，然后插入線栓，近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動脈的線栓，以防止血從小洞中流出；松開右側(cè)頸內(nèi)動脈暫時的結(jié)扎線，輕輕送入線栓到大腦中動脈，當(dāng)感覺到阻力時停止，系牢線栓。縫合皮膚。

5. 60min后，線栓輕輕從大腦中動脈移出，系牢頸外動脈結(jié)扎線；然后松開右側(cè)頸總動脈暫時的結(jié)扎線，小鼠進行再灌注。

6. 48h后神經(jīng)功能評分，Garcia評分。