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4-29
一、研究背景：胚胎發(fā)育中的“糖密碼”在生物學(xué)領(lǐng)域，蛋白質(zhì)功能受多種化學(xué)修飾調(diào)節(jié)，其中糖基化修飾備受關(guān)注。不同于復(fù)雜的細胞外糖鏈，O-GlcNAc（O-連接的N-乙酰葡萄糖胺）作為一種可逆的單糖修飾，廣泛存在于RNA聚合酶II、轉(zhuǎn)錄因子等關(guān)鍵蛋白上，以及在細胞內(nèi)數(shù)千種蛋白質(zhì)上發(fā)揮作用，涉及從糖酵解至細胞周期、轉(zhuǎn)錄及翻譯等眾多基礎(chǔ)細胞活動，可能介導(dǎo)基因表達對環(huán)境變化的響應(yīng)。哺乳動物早期胚胎發(fā)育階段，會經(jīng)歷諸多代謝變化且依賴O-GlcNAc修飾相關(guān)酶存活。此前研究發(fā)現(xiàn)，負責(zé)添加O-...
4-29
激光共聚焦實驗，或稱為激光共聚焦顯微鏡實驗，是一種基于激光共聚焦技術(shù)的高分辨率光學(xué)成像方法。激光共聚焦技術(shù)結(jié)合了激光的高單色性和高方向性，以及共聚焦原理，實現(xiàn)了對樣本的高精度、高分辨率成像。在實驗過程中，激光束通過顯微鏡的物鏡聚焦到樣本的特定區(qū)域，激發(fā)該區(qū)域內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光。隨后，熒光信號被顯微鏡的探測器收集并轉(zhuǎn)換為電信號，通過計算機處理得到樣本的共聚焦圖像。激光共聚焦實驗的注意事項涵蓋多個方面，以下是詳細介紹：1、實驗前準(zhǔn)備樣品處理固定：根據(jù)樣品類型選擇合適的固定方法，...
4-25
乳酸是糖酵解的最終產(chǎn)物，作為碳源和信號分子，為腫瘤發(fā)展提供代謝、微環(huán)境和免疫基礎(chǔ)。最近，乳酸被重新定義為表觀遺傳學(xué)的標(biāo)志，通過組蛋白修飾實現(xiàn)免疫重塑和腫瘤進展。然而，大多數(shù)非表觀遺傳蛋白的乳酸化及其功能尚未被充分研究。先天免疫系統(tǒng)通過多個模塊組成的信號級聯(lián)反應(yīng)來響應(yīng)入侵或細胞損傷。乳酸通過直接與MAVS結(jié)合抑制RLR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，但乳酸對先天免疫反應(yīng)的胞質(zhì)DNA感應(yīng)的影響尚不清楚。cGAS被鑒定為感知胞質(zhì)DNA并觸發(fā)先天免疫反應(yīng)的關(guān)鍵酶，其活性和蛋白穩(wěn)定性受翻譯后修飾的調(diào)節(jié)。泛素...
4-25
?研究背景膠質(zhì)母細胞瘤（Glioblastomamultiforme,GBM）是一種高度侵襲性的WHOIV級腦部惡性腫瘤。近年來的研究表明，膠質(zhì)瘤在治療過程中可能表現(xiàn)出從新生腫瘤到老化腫瘤的演變趨勢，提示細胞衰老可能在GBM治療中發(fā)揮作用。然而，細胞衰老在腫瘤中的作用復(fù)雜，一方面可能抑制腫瘤，另一方面可能通過衰老相關(guān)分泌表型（SASP）促進腫瘤復(fù)發(fā)和抗藥性。細胞衰老（Senescence）是一種細胞周期停滯狀態(tài)，通常被認為具有抗腫瘤作用。然而，越來越多的證據(jù)表明，放療和化療可...
4-17
研究背景鐵死亡（Ferroptosis）是一種由鐵依賴性脂質(zhì)過氧化驅(qū)動的調(diào)節(jié)性細胞死亡形式，近年來被證實與多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，特別是在腫瘤領(lǐng)域。鐵死亡的調(diào)控涉及多個因素，其中NRF2是一個關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄共激活因子，通過調(diào)控其靶基因（如GPX4）來抑制鐵死亡。此外，CLDN6（緊密連接蛋白6）作為一種重要的腫瘤抑制因子，在乳腺癌中的表達下調(diào)，且與鐵死亡的關(guān)聯(lián)尚未明確。本研究旨在深入探討CLDN6與鐵死亡之間的聯(lián)系，并揭示其在乳腺癌中的潛在調(diào)控機制，以期為乳腺癌的預(yù)后預(yù)測和治...
4-17
真核細胞中的蛋白質(zhì)翻譯加工主要有兩條途徑，一條是信號肽引導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)-高爾基體途徑，即分泌途徑，另一條是游離核糖體途徑。前者包括分泌蛋白、膜蛋白和溶酶體蛋白，后者主要是胞漿蛋白、核蛋白和一些細胞器蛋白。分泌途徑的翻譯主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)完成，而另一條途徑是在游離核糖體上完成翻譯，然后被特異定位標(biāo)簽引導(dǎo)進入線粒體、葉綠體、過氧化物酶體及細胞核等處，沒有標(biāo)簽的就留在胞漿。2004年諾貝爾化學(xué)獎頒發(fā)給以兩名色列和一名美國科學(xué)家，以表彰他們發(fā)現(xiàn)了泛素調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)降解，從此拉開了研究生物體泛素化...
4-17
瑞士卷技術(shù)有助于完整的腸或結(jié)腸切片進行組織學(xué)評估，區(qū)分腸道結(jié)構(gòu)特征；進而定量測量腸道炎癥和腫瘤。這種技術(shù)非常適合于綜合評估腸上皮的組織病理學(xué)和分子特征。1.麻醉C57BL/6小鼠。2.切開腹部皮膚和肌肉，暴露腹腔。3.鑒定盲腸和回腸，在盲腸上部取回腸一段，確認好遠側(cè)端和近側(cè)端。4.剪開回腸，用蘸生理鹽水的棉簽去除腸內(nèi)容物。5.用眼科鑷，從回腸的遠側(cè)端向近側(cè)端折疊。6.用4號針頭固定折疊后的回腸。7.折疊后的回腸放到4%多聚甲醛固定液中。8.24h后，用自動脫水機脫水，然后石蠟...
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